譯/《水產(chǎn)前沿》 鐘綺文 盡管1-單甘脂前途光明,但仍有很多未知,需要養(yǎng)殖戶參與更多的研究試驗(yàn)。 圖1 滲透壓休克(即內(nèi)穩(wěn)態(tài)受破壞)后膜復(fù)原情況 全面解讀 盡管目前還在調(diào)查與AHPN密切相關(guān)的多個(gè)病原體,但主要致病菌是帶毒力的副溶血性弧菌株(Vibrio parahaemolyticus)。這菌株與霍亂弧菌(V.cholera)和哈氏弧菌(V. harveyi)相似度極高, 這給研究開了頭,找尋解決方法。 副溶血性弧菌可以通過許多不同的載體來傳播,例如浮游動(dòng)物、浮游植物或池塘有害殘留物。蝦的含幾丁質(zhì)的外殼也被懷疑是弧菌的攜帶者。因?yàn)樯婕暗胶芏噍d體,而且弧菌給池塘生態(tài)系統(tǒng)的一些有機(jī)物也帶來好處,沒有必要也不可能根除弧菌。 要解決像AHPN這樣復(fù)雜的問題需要一個(gè)全面的方法。盡管對它的基本機(jī)制還只停留在表層理解,但在大家緊密合作下相關(guān)知識迅速積累。采用一個(gè)整體方法來關(guān)注蝦塘中較低感染濃度的載體,阻止其在養(yǎng)殖對象中形成群體,但能中和副溶血性弧菌產(chǎn)生的毒素并恢復(fù)平衡,降低AHPN的影響。 另一種推薦用于阻止AHPN的方法是在細(xì)菌生物膜包裹細(xì)菌之前在蝦胃壁里破壞它的結(jié)構(gòu),因?yàn)樯锬つ鼙Wo(hù)細(xì)菌免受抗菌化合物的傷害。有研究認(rèn)為投喂1-單甘脂通過阻止入副溶血性弧菌的繁殖,進(jìn)而能抑制群體形成。還有已知有乳化性能的特定單甘脂,可以在生物膜初期增加滲透性。我認(rèn)為這樣的組合是1-單甘脂抗AHPN的力量。 1-單甘脂的影響 圖2 副溶血弧菌對食用含干制或液態(tài)1-單甘酯的蝦的存活率實(shí)驗(yàn)結(jié)果 圖3 使用含短鏈和中鏈1-單甘酯配方的蝦的死亡率實(shí)驗(yàn)結(jié)果 1-單甘脂基于一種能酯化在甘油分子中阿爾法位置脂肪酸的新技術(shù)。結(jié)果得出一個(gè)有特殊結(jié)構(gòu)的新分子,既不是一種脂肪,也不是一種酸。這些分子無腐蝕性,有各自獨(dú)立工作的pH值,還有好的熱穩(wěn)定性,這得益于核心部分的共價(jià)鍵。這都使得這些分子適合添加到飼料。 這么多年來,1-單甘脂的抗菌性和抗病毒性均影響著人類制藥業(yè)和動(dòng)物繁殖業(yè)。它們并不歸類為抗生素,因?yàn)榇_切來說,這些分子并沒有殺死病原體。1-單甘脂阻止細(xì)菌獲得能量和水,所以基本上是把細(xì)菌餓死。 由荷蘭Framelco的研究發(fā)展部門和里斯本大學(xué)制藥學(xué)院一起進(jìn)行基礎(chǔ)研究,并發(fā)現(xiàn)1-單甘酯能通過改變細(xì)菌膜的穩(wěn)定和屏蔽膜中具促進(jìn)吸收的水通蛋白3(AQP-3),從而影響細(xì)菌的內(nèi)穩(wěn)態(tài)(如圖1)。 1-單甘酯配方 在泰國測試了兩種類型的配方:一種是含有短鏈1-單甘酯,另一種是含有短鏈和中鏈1-單甘酯。兩種配方都以干粉的形式來測試,用載體以噴涂方式加入至蝦料。挑選出5個(gè)蝦場做實(shí)驗(yàn),兩個(gè)經(jīng)常出現(xiàn)AHPN復(fù)發(fā)問題,兩個(gè)偶爾會(huì)出現(xiàn)這樣的問題,一個(gè)蝦場沒出現(xiàn)AHPN記錄。 從一個(gè)完整生產(chǎn)周期的結(jié)果來看,配方中含短鏈和中鏈1-單甘酯的表現(xiàn)更好:死亡率明顯下降,沒必要提早收蝦。之前經(jīng)常出現(xiàn)AHPN復(fù)發(fā)問題的兩個(gè)蝦場,其結(jié)果顯示養(yǎng)殖周期里沒有AHPN出現(xiàn)。但在一些蝦塘中,蝦的表現(xiàn)還是不理想,這可能暗示當(dāng)前環(huán)境中還有較高病原體進(jìn)入,使健康情況受損。如果是沒發(fā)生過AHPN的池塘,蝦的生長情況更好,雖然不是很顯著地體現(xiàn)出來。 另一個(gè)結(jié)合實(shí)驗(yàn)室和細(xì)菌內(nèi)穩(wěn)態(tài)的實(shí)驗(yàn)確立了短鏈和中鏈1-單甘酯間的協(xié)同關(guān)系,弧菌實(shí)驗(yàn)中添加短鏈和中鏈1-單甘酯的蝦料來投喂與只用單一短鏈或中鏈1-單甘酯的蝦料比較,結(jié)果顯示前者比后者的死亡率下降了16%。 后續(xù)研究 即便改良了配方,最初全面防控AHPN的試驗(yàn)與其后續(xù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果度不可能完全一致。通?捎^察到死亡率下降了20-30%,有些地方的死亡率甚至沒有。 小規(guī)模的實(shí)驗(yàn)顯示,投喂富含1-單甘酯鹵蟲的蝦,其組織在瓊脂培養(yǎng)中有強(qiáng)烈的轉(zhuǎn)變,從綠色群體轉(zhuǎn)為黃色群體。短鏈1-單甘酯的水溶性和把配方與顆粒料結(jié)合的難點(diǎn)可能可以解釋這不連續(xù)的結(jié)果。 更多的研究需要增加1-單甘酯的潛能。在越南水產(chǎn)研究所的大規(guī)模試驗(yàn),發(fā)現(xiàn)在制粒前把1-單甘酯分子與粉料混合,這樣飼料的效果更為一致。 實(shí)驗(yàn)表明用含1-單甘酯蝦料投喂的蝦在生長和存活率方面都比對照組表現(xiàn)好,但也發(fā)現(xiàn)某些情況下,外在消極因素,如氣候和水質(zhì)的改變,會(huì)使分子的能力失效。 還有額外調(diào)查1-單甘酯對抗生素的影響,一個(gè)實(shí)驗(yàn)組持續(xù)使用1-單甘酯的飼料,在發(fā)生AHPN早期使用了短期的抗生素來治療,這實(shí)驗(yàn)組的蝦與只用抗生素治療的對照組以及沒有使用抗生素或1-單甘酯治療的空白對照組的蝦來對比。結(jié)果顯示,飲食中含1-單甘酯的實(shí)驗(yàn)對象更容易接受抗生素的治療。在接受1-單甘酯和短期抗生素治療的實(shí)驗(yàn)組中,蝦均健康并達(dá)到收成大小,而僅用抗生素治療的需要提早收蝦,空白對照組的結(jié)果最差。 從這實(shí)驗(yàn)中提出了1-單甘酯抑制膜的產(chǎn)生,并在藥物治療中把有害的細(xì)菌更好地暴露出來。很多國家地區(qū)禁止使用抗生素,但沒有這些化學(xué)物質(zhì)的情況下我們需要一個(gè)方法。 生物藥效率:1-單甘酯是干劑還是液體? 在研究加強(qiáng)1-單甘酯效果的方法里,Donald Lightner博士主持的一個(gè)由亞利桑那大學(xué)獸醫(yī)科學(xué)和微生物學(xué)聯(lián)合完成的實(shí)驗(yàn)中,使用含有幾種1-單甘酯和微量成分的飼料,干制配方和液體配方都被測試了。為避免受缺失外部易變因素的影響,以高感染率來進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。 意想不到的結(jié)果出現(xiàn)了,由于在高感染率的情況下,以干制1-單甘酯配方為食的蝦因AHPN,全部在3天內(nèi)死了;但以液態(tài)配方投喂的蝦,一直與AHPN抗?fàn)幹,直到?shí)驗(yàn)結(jié)束,還保留有93.3%的存活率(如圖2)。 在人類或家禽,1-單甘酯通常依附于分子到載體都常應(yīng)用在干劑形式;消化道內(nèi),1-單甘酯從載體中釋放出來,然后發(fā)揮它抗菌能力。 總結(jié)得出,飼料快速通過蝦體,使得分子不能完全發(fā)揮作用,因此減弱了它們的生物藥效率。這可能可以解釋早期實(shí)驗(yàn)中的不足。 液體配方與陽性對照組的表現(xiàn)相比能減少80%的死亡率(見圖3),蝦體一天進(jìn)食的食物里,其中液態(tài)1-單甘酯占0.8%。在這些實(shí)驗(yàn)組里,蝦死亡率表現(xiàn)在6.7%,但經(jīng)過檢查后發(fā)現(xiàn),這些蝦體的死亡并非因?yàn)锳HPN,更像是因?yàn)樽韵鄽垰ⅰ?/div> 亞利桑那大學(xué)水產(chǎn)病害實(shí)驗(yàn)室對樣品蝦進(jìn)行組織學(xué)分析,發(fā)現(xiàn)投喂液態(tài)1-單甘酯的蝦,其感染率顯著下降。完全根治副溶血性弧菌是不可能的,但在實(shí)驗(yàn)期間蝦體中有少量的細(xì)菌是不足以導(dǎo)致AHPN的發(fā)生。 一些實(shí)驗(yàn)正在調(diào)查液態(tài)1-單甘酯的長期影響,初期數(shù)據(jù)顯示出一個(gè)光明的未來,目前大部分池塘沒有AHPN要爆發(fā)的跡象。在感染嚴(yán)重蝦場的池塘,不能每次都阻止AHPN的發(fā)生,但會(huì)推遲幾周。 中國水產(chǎn)頻道獨(dú)家報(bào)道,轉(zhuǎn)載請說明出處《水產(chǎn)前沿》雜志 fuqitext.com ,違者追究法律責(zé)任, 謝謝合作。 【關(guān)鍵字】:1-單甘脂 EMS 對蝦 水產(chǎn)養(yǎng)殖 |

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