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標(biāo)題: （原創(chuàng)）單胞藻培養(yǎng)相關(guān)事項(xiàng) [打印本頁(yè)]
作者: pl35    時(shí)間: 2014-1-10 10:15
標(biāo)題: （原創(chuàng)）單胞藻培養(yǎng)相關(guān)事項(xiàng)
本帖最后由 煙花雨 于 2014-1-11 14:39 編輯

對(duì)蝦種苗企業(yè)的生存主要是依靠蝦苗養(yǎng)殖效果來(lái)決定的，蝦苗成活率的高低直接影響著產(chǎn)業(yè)鏈的上上下下。單胞藻對(duì)于蝦苗早期是最適合的餌料，如果培育得當(dāng)，不僅可以節(jié)約成本，減少育苗水體環(huán)境負(fù)荷，尤其是對(duì)于蝦苗的發(fā)育打下堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)，提高成活率。結(jié)合個(gè)人的育苗感受，投喂單胞藻與不投喂的區(qū)別還是有的，比如苗的變態(tài)時(shí)間縮短，活力個(gè)頭大小，水質(zhì)均優(yōu)于未投喂單胞藻的苗，當(dāng)然如果培育不得當(dāng)，反作用也有，比如投喂有害菌超標(biāo)的藻液，藻類老化，投喂過(guò)量等。所以合理運(yùn)用，方可收到理想效果。限于個(gè)人水平，描述方法的錯(cuò)誤不足之處，懇請(qǐng)大家指正。

一 單胞藻純培養(yǎng)室操作描述
儀器使用
  (1) 超凈工作臺(tái)
使用前提前開(kāi)機(jī)，打開(kāi)紫外線燈和風(fēng)機(jī)開(kāi)關(guān)20分鐘；超凈臺(tái)面上不存放不必要的物品，保持工作區(qū)內(nèi)的凈化氣流不受干擾，工作時(shí)盡量避免作明顯干擾氣流的動(dòng)作；超凈臺(tái)保持光滑水平，光滑便于用酒精消毒布擦，水平是倒培養(yǎng)基時(shí)使培養(yǎng)皿內(nèi)平板厚度一致；工作時(shí)超凈臺(tái)周圍空氣流動(dòng)要緩慢，雜菌盡量減少，所以要定期清潔消毒保種室內(nèi)，關(guān)閉門窗，盡可能減少雜菌數(shù)量；空氣過(guò)濾網(wǎng)定期清潔。

（2）真空泵和溶劑過(guò)濾器及過(guò)濾膜
此環(huán)節(jié)過(guò)濾只是為單胞藻純培養(yǎng)室（保種，提純，擴(kuò)培試管級(jí)）準(zhǔn)備清潔無(wú)菌海水。其他級(jí)別的培養(yǎng)無(wú)需此環(huán)節(jié)。
過(guò)濾膜使用0.2微米孔徑，不可用手拿，用鑷子選取；真空泵與溶劑過(guò)濾器之間通過(guò)合適口徑的橡膠管連接緊密，每次過(guò)濾要注意濾膜的過(guò)濾效果，防止濾孔阻塞影響過(guò)濾效果；濾瓶?jī)?nèi)的濾液不能沒(méi)過(guò)濾板出水口，否則濾液將被抽吸入真空泵，導(dǎo)致真空泵損壞；
應(yīng)該使濾板內(nèi)的營(yíng)養(yǎng)液過(guò)濾盡后（無(wú)水滴）才能停泵。要定期注意真空泵內(nèi)油量，注意加油。
(3) 恒溫鼓風(fēng)干燥箱
設(shè)定溫度時(shí)。先按控溫儀功能鍵SET進(jìn)入溫度設(shè)定狀態(tài)，此時(shí)SP設(shè)定顯示一閃一閃，要按移動(dòng)位鍵配合加鍵或減鍵，設(shè)定時(shí)先從分位數(shù)字設(shè)定，一直到百位數(shù)，設(shè)定結(jié)束需按一下功能鍵SET,此時(shí)干燥箱進(jìn)入升溫狀態(tài)，加熱指示燈亮，當(dāng)箱內(nèi)溫度接近設(shè)定溫度時(shí)，加熱指示燈閃動(dòng)多次，控制進(jìn)入恒溫狀態(tài)。使用注意事項(xiàng)：物品不能堆得太滿，更不能堵住出風(fēng)口，以免影響溫度均勻上升；若是有牛皮紙和保鮮膜時(shí)，溫度不能超過(guò)180度；取出物品時(shí)，箱內(nèi)外溫差不宜過(guò)高，防止玻璃器皿炸裂；橡膠制品不能放入。

（4）加濕器
配合生化培養(yǎng)箱使用。
水源是蒸餾水；不應(yīng)容器內(nèi)帶水移動(dòng)加濕器；加水時(shí)應(yīng)在容器上表示的滿水線為止
應(yīng)注意的事項(xiàng)：平時(shí)留意觀察水箱的存水量，及時(shí)予以補(bǔ)充，遠(yuǎn)離熱源，腐蝕物。

(5)  蒸汽消毒器
容器加水時(shí)，水位一定要超過(guò)電熱管，最好是到3個(gè)支撐點(diǎn)的下緣，如果連續(xù)使用，應(yīng)在每次消毒前補(bǔ)足蒸發(fā)水量，不然少水會(huì)燒壞電熱管；蓋上的放氣軟管插入消毒桶圓槽內(nèi)，對(duì)正蓋和主體的螺栓槽，依次將相對(duì)方的翼型螺母予以旋緊，使蓋與主體密合，加熱開(kāi)始時(shí)，應(yīng)將放氣閥與安全閥的小手柄扳至垂直放氣方位，必須待有較急蒸汽噴出，即將小手柄扳回水平“關(guān)閉”方位。當(dāng)?shù)竭_(dá)所需壓力和溫度，計(jì)算消毒時(shí)間，消毒畢后，關(guān)閉電源，待壓力指針指向0時(shí)，將放氣閥的小手柄扳至垂直放氣方位，氣放完后，打開(kāi)容器蓋。物品消毒后要迅速干燥。應(yīng)注意滅菌液體時(shí)，不超過(guò)盛液體容器體積的3/4，瓶塞不可用軟木塞或未打孔的橡膠塞。滅菌器內(nèi)冷空氣必須完全排除。因?yàn)榭諝獾呐蛎泬捍笥谒魵獾呐蛎泬海?dāng)水蒸氣含冷空氣時(shí)，壓力表所表示的壓力是水蒸氣壓力和部分冷空氣壓力之和，不是水蒸氣的實(shí)際壓力，而同一壓力下的實(shí)際溫度，含空氣的蒸汽低于飽和蒸汽，這樣導(dǎo)致達(dá)不了消毒效果。絕不可堵塞安全閥出氣孔，必須留空位保證其暢通放氣，發(fā)現(xiàn)超溫超壓，立即斷電。
蒸餾器
先關(guān)閉放水閥，打開(kāi)進(jìn)水閥，待溢水皮管有水流出，方可接通電源，此時(shí)可暫時(shí)關(guān)閉進(jìn)水閥，待出水皮管有蒸餾水流出，打開(kāi)進(jìn)水閥，制備蒸餾水。定期清洗蒸餾器內(nèi)壁，除去水垢，不然影響蒸餾水質(zhì)量和使用效果。切不可關(guān)閉水閥制備蒸餾水，否則燒壞電熱管。
（6）鼓風(fēng)機(jī)
定期更換吸氣口的過(guò)濾棉，異常情況，請(qǐng)電工檢查
（7）空調(diào)
保種室若有生長(zhǎng)藻種，需維持恒定溫度，反之關(guān)閉。一級(jí)，二級(jí)空調(diào)視外界氣溫調(diào)整開(kāi)關(guān)。

二 衛(wèi)生消毒
工具衛(wèi)生消毒
1  濾水筒式過(guò)濾器。筒式過(guò)濾器的濾芯應(yīng)用一次更換一次，用過(guò)的濾芯浸泡在1%鹽酸溶液中消毒12h以上。然后用洗潔精清洗，再用足量清水沖洗干凈，晾干備用。（濾芯規(guī)格應(yīng)小于等于0.5微米）。
2 試管（規(guī)格10毫升到20毫升），錐形瓶（50毫升到200毫升），500ml錐形瓶，2.5L瓶廣口瓶，移液管，移液槍管/盒，玻璃氣管，膠氣管，氣石，溶劑過(guò)濾器，培養(yǎng)皿。用過(guò)后應(yīng)當(dāng)用清水清洗后浸泡于1% 鹽酸12h以上（溶劑過(guò)濾器除外，浸泡時(shí)相近大小器皿分類放不同的消毒桶，規(guī)格相差大，易導(dǎo)致相互碰撞碎爛）然后用洗潔精清洗(用毛刷清洗試管底部時(shí)，不可太用力，否則底部易破裂)，再用大量清水沖洗干凈，風(fēng)干或曬干，高壓滅菌后，放入恒溫干燥箱（膠氣管，氣石除外）干燥備用。
3聚乙烯藻袋 用于二級(jí)藻類藻種掛袋培養(yǎng)或3級(jí)擴(kuò)培（一般使用盛裝藻液12升左右）。先用清水沖洗干凈內(nèi)外，浸泡于1% 鹽酸12h以上，再用大量清水沖洗干凈，風(fēng)干或曬干，備用。由于藻袋近似密封性，對(duì)于防止微生物污染有很好的效果。
4毛巾  保種室 ，一級(jí)和二級(jí)毛巾不可混用，所用毛巾后都應(yīng)消毒清洗晾干后備用。
5錫箔紙 除非粘上油污或污物以及破損，都應(yīng)重復(fù)使用
6牛皮紙 定期拿到烘箱烘干
7定期更換空氣過(guò)濾器（用于1，2級(jí)培養(yǎng)的進(jìn)氣過(guò)濾）的濾芯，濾芯已油化或沖散的棄去。
8定期更換鼓風(fēng)機(jī)進(jìn)風(fēng)口的過(guò)濾棉
9對(duì)新購(gòu)入的器皿應(yīng)先除去包裝沾染的污垢后，用洗潔精刷洗，流水沖凈，再浸泡于1%的鹽酸12h，使游離的堿性物質(zhì)除去，再用清水沖洗干凈，風(fēng)干或曬干備用。
室內(nèi)衛(wèi)生消毒
1保種室每天早上用清水擦洗實(shí)驗(yàn)臺(tái)面，地板，墻壁，木架后，開(kāi)紫外燈消毒20分鐘，此時(shí)關(guān)掉空調(diào)，關(guān)掉日光燈，由于紫外燈照射會(huì)產(chǎn)生一定量的臭氧，對(duì)人體有害，所以消毒關(guān)閉紫外燈后人應(yīng)隔一段時(shí)間再進(jìn)去。進(jìn)保種室換鞋。
2一級(jí)和二級(jí)室每天清潔，接種前接種后承載物框架都應(yīng)用消毒液消毒。
3門口消毒池定期更換消毒藥水（高錳酸鉀）  
4常用消毒劑濃度 1%鹽酸，次氯酸鈉20ppm（有效氯），碘液（1000ppm）,酒精70-75%,高錳酸鉀1mg/L.

三 接種
藻種固體培養(yǎng)基制備
所需燒杯，玻棒須清洗干凈，錐形瓶和培養(yǎng)皿須消毒清洗滅菌烘干。將稱好的純化瓊脂粉加入燒杯再加入一定量的海水，加熱（必須不停攪拌，以免瓊脂糊底燒焦）至完全融化，加熱后的瓊脂培養(yǎng)基應(yīng)當(dāng)透明無(wú)顯著沉淀，若明顯，可采用清潔的白色薄絨布或中間夾有薄層吸水棉的雙層紗布鋪在漏斗上趁熱過(guò)濾，融化畢后精確加入營(yíng)養(yǎng)鹽（維生素B溶液須等培養(yǎng)基高壓滅菌后冷卻至50攝氏度以下再加）。培養(yǎng)基采用121攝氏度高壓蒸汽滅菌20至30分鐘即可，培養(yǎng)基滅菌后應(yīng)立即取出，冷卻至50攝氏度以下，即加維生素B溶液。將盛裝培養(yǎng)基的錐形瓶和培養(yǎng)皿放在超凈工作臺(tái)上，點(diǎn)燃酒精燈，右手托起錐形瓶底，將瓶口在酒精燈稍加燒，然后迅速將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中，以鋪滿皿底為止（厚薄適中）。鋪放好后，放置20-30分鐘，待培養(yǎng)基凝固后，即開(kāi)始操作。若是做斜面培養(yǎng)基，則加入維生素B溶液后，將盛裝培養(yǎng)基的錐形瓶和試管以及一根厚約1厘米的小木板放在超凈工作臺(tái)上。分裝約為試管高度的1/3-2/3（視情況操作），分裝量應(yīng)以能形成2/3底層和1/3斜面量為好，擺置成適當(dāng)斜面，待其自然凝固。培養(yǎng)基制備好后，如發(fā)現(xiàn)破裂，水分浸入，色澤異常等均應(yīng)棄去.
待凝固后即進(jìn)行操作，現(xiàn)一般采用平板劃線接種和涂布接種。

平板劃線接種
接種環(huán)在酒精燈火焰上充分燒紅后，接種柄一邊轉(zhuǎn)動(dòng)一邊慢慢來(lái)回通過(guò)火焰3次，待冷卻至室溫方可挑取藻種（為保證藻種不被燙死，挑種前可將接種環(huán)接觸培養(yǎng)皿內(nèi)壁或培養(yǎng)基），迅速接種至新培養(yǎng)基（劃線可采用斜線法，方格法，曲線法，放射法等）。左手握住平板，用大拇指和食指稍稍抬起皿蓋，同時(shí)靠近火焰周圍，右手持接種環(huán)伸入皿內(nèi)，在平板上一個(gè)區(qū)域作劃線（依方法不同，動(dòng)作不同）。劃線時(shí)使接種環(huán)與平板表面成30-40度角輕輕接觸，以腕力在表面作較快的滑動(dòng)（注意不要?jiǎng)澠破桨灞砻婊蛏爝M(jìn)培養(yǎng)基內(nèi)）。接種環(huán)挑種后和劃線完抽出時(shí)均不可碰及皿壁/口，更不能碰其它物體和臺(tái)面。接種完后，將接種環(huán)從柄部至環(huán)端逐漸通過(guò)酒精燈火焰滅菌，不能直接燒環(huán)，以免殘留在接種環(huán)上的藻體或菌體爆濺污染空間。上述操作完成后，即用無(wú)菌封口膜封培養(yǎng)皿口（膜使用前須用酒精消毒，紫外燈消毒，風(fēng)干），封口時(shí)，用左手大拇指摁住膜一邊末端，右手大拇指和食指捏住另一邊末端，迅速繞培養(yǎng)皿口繞一圈，封口。
涂布接種
所用種液必須經(jīng)過(guò)弧菌檢測(cè)合格后方可使用。涂布棒在火焰上慢慢來(lái)回過(guò)火焰3次，冷卻（不可驟冷），將種液用移液槍從試管吸出注入平板上面（槍管不可碰及試管外壁，更不能碰及其它物品或臺(tái)面），迅速用涂布棒在表面作來(lái)回左右的涂布，讓藻液分布均勻，畢后，封口同平板劃線。

補(bǔ)充：試管液體培養(yǎng)基接種
所用種液必須經(jīng)過(guò)弧菌檢測(cè)合格后方可使用。火焰滅菌前試管口外壁不能有水滴（易導(dǎo)致受熱不均而破裂）,燒試管口時(shí)，試管傾斜45度角，不斷移動(dòng)試管，使試管口受熱均勻，滅菌時(shí)間3秒左右。滅菌后不能驟冷，防止試管破裂。畢后，用盛裝營(yíng)養(yǎng)液150或200ml的錐形瓶（也要滅菌瓶口）向試管中傾倒?fàn)I養(yǎng)液，每次只能拿一個(gè)試管（注：若幾個(gè)試管對(duì)比時(shí)，可以同時(shí)拿在手里，用大拇指和手掌），倒好后，同樣試管和錐形瓶口滅菌，試管塞也要滅菌，塞試管塞時(shí)不要移動(dòng)試管迎接塞，以免試管在移動(dòng)中納入可能含菌空氣，火焰旁為無(wú)菌。
所有試管分裝好后，即接種。用移液槍選取移液量（試管口滅菌），注入新培養(yǎng)基，槍管不可碰及管外壁，更不能碰及其它物品或臺(tái)面，一支槍管只能和同一種液使用，選取另一試管種液時(shí)必須更換槍頭。接種畢后，選取合適光照溫度培養(yǎng)。由于試管培養(yǎng)是靜置培養(yǎng)，而在靜置條件下，藻細(xì)胞會(huì)聚集在試管底部，且藻細(xì)胞周圍會(huì)形成透過(guò)養(yǎng)分的屏障，營(yíng)養(yǎng)鹽的攝入受阻，光照吸收不均，為使?fàn)I養(yǎng)鹽攝入正常，藻細(xì)胞受光均勻，需要定時(shí)搖置試管（手先噴消毒酒精，手腕使勁搖，不要擺臂，不能倒置搖）

三角瓶，500ml瓶，2.5L瓶液體培養(yǎng)基接種
三角瓶接種需無(wú)菌操作。500ml瓶，2.5L瓶液體培養(yǎng)基接種均在室內(nèi)衛(wèi)生條件下操作。3種瓶和所需營(yíng)養(yǎng)液及錫紙，移液管，洗耳球，氣管，氣石均需經(jīng)消毒清洗，滅菌后使用。三角瓶需定時(shí)搖置，500ml，2.5L瓶培養(yǎng)在通氣條件下培養(yǎng)。

二級(jí)聚乙烯藻袋液體培養(yǎng)基接種
氣管，氣石均需經(jīng)消毒清洗，滅菌后使用，抽藻管前次用畢后應(yīng)當(dāng)用水泵將管內(nèi)灌滿消毒鹽酸溶液，今次用前需用海水或淡水沖洗干凈后使用。選取的種液應(yīng)當(dāng)是無(wú)明顯沉淀，泡沫，原生動(dòng)物，附著物，色澤正常，藻細(xì)胞密度大，形態(tài)正常，弧菌檢測(cè)合格后選用。所用海水漂白水消毒有效氯應(yīng)足10ppm，曝氣12小時(shí)，檢測(cè)余氯，加硫代硫酸鈉中和，方可使用。若使用稀釋的漂白水，應(yīng)當(dāng)天配制當(dāng)天使用，而未使用的要在24小時(shí)后棄去。且稀釋的漂白水必須加蓋放在避光的容器內(nèi)保存。由于漂白水會(huì)隨時(shí)間漸漸分解，一次性購(gòu)入的漂白水不應(yīng)太多，不要過(guò)量?jī)?chǔ)存，以免影響滅菌功效。

1,2，3級(jí)接藻示意：
試管 → 三角瓶 →   500ml瓶子 →   2500ml瓶子→     20升的藻種聚乙烯袋  →  18升的擴(kuò)培藻聚乙烯袋或者培藻池


  
作者: pl35    時(shí)間: 2014-1-10 10:16
相關(guān)說(shuō)明：
1  母液的配置可以參考教科書(shū)上所寫(xiě)，然后結(jié)合當(dāng)?shù)氐乃|(zhì)適當(dāng)修改即可。氮，磷，鐵元素，維生素B1,B12是必須使用,維生素母液保存于低溫弱光環(huán)境下，其中維生素的添加需要先高壓滅菌后再加入母液中。其余營(yíng)養(yǎng)鹽先配置好后，再滅菌。如果是硅藻類，還應(yīng)加上硅酸鈉。

2  保種室所需營(yíng)養(yǎng)液（母液千分之0.8的比例添加）除需高壓滅菌外還必須經(jīng)過(guò)真空泵抽濾后才能用，微孔濾膜直徑為50毫米，孔徑為0.2微米。

3 接種比例A:試管0.07—0.09（隨密度大小變化），10毫升試管加營(yíng)養(yǎng)液7毫升，藻種0.5毫升，20毫升試管中營(yíng)養(yǎng)液加12.5毫升營(yíng)養(yǎng)液，1毫升藻種。B:三角瓶0.09-0.11。在100毫升，150毫升，200毫升，250毫升三角瓶中分別加營(yíng)養(yǎng)液，70，80，120，150毫升（可按一試管對(duì)應(yīng)一個(gè)三角瓶加入），C: 500毫升瓶（400毫升營(yíng)養(yǎng)液）(按1個(gè)三角瓶對(duì)應(yīng)1個(gè)500毫升瓶加入)D :2.5升瓶（2升營(yíng)養(yǎng)液）（按1個(gè)500毫升瓶對(duì)應(yīng)1個(gè)2.5升瓶加入），注意：上述若發(fā)現(xiàn)藻生長(zhǎng)情況不好，需要先鏡檢，判斷后再?zèng)Q定是否接種。
一般情況下3袋二級(jí)藻種應(yīng)先擴(kuò)培接種于容量400升的桶（海水貯備及營(yíng)養(yǎng)液提前配置好），然后立即進(jìn)行二級(jí)藻袋擴(kuò)種，每個(gè)聚乙烯袋加18升左右藻水。

4 保種培養(yǎng)基制備：按1.5%的比例加瓊脂粉，煮沸后加營(yíng)養(yǎng)鹽（母液千分之1添加），高壓滅菌。維生素需高壓滅菌后培養(yǎng)基冷卻至30攝氏度方可加入。（可用劃線法，涂布法等分離培養(yǎng)藻種）

5 儀器的清洗維護(hù)。溶劑過(guò)濾器使用后只用洗潔精和清水清洗。高壓滅菌后備用。其它玻璃儀器，氣管，氣石，移液槍筒使用后需要浸泡在百分之一到百分之十的稀鹽酸溶液中至少半天，才能拿出清洗，風(fēng)干，高壓滅菌后備用。
作者: pl35    時(shí)間: 2014-1-10 10:31
說(shuō)明： 10的2次方標(biāo)示成10^2，以下數(shù)字的次方通用此表示法

三級(jí)藻生產(chǎn)
三級(jí)藻系統(tǒng)包括用水處理以及配送，溫度與光照控制，藻種的供應(yīng)等。為確保擴(kuò)大培養(yǎng)成功，從接種到收獲的培養(yǎng)時(shí)間應(yīng)該盡量縮短，以避免因?yàn)殚_(kāi)放式培養(yǎng)隨培養(yǎng)規(guī)模擴(kuò)大接觸外界感染源時(shí)間加長(zhǎng)，三級(jí)藻池滋生過(guò)多的有害生物，使三級(jí)培養(yǎng)失敗。
1—1高水位低密度接種（接種密度為P×10^4cell/ml,P為接種密度萬(wàn)位數(shù)值）（未特別說(shuō)明藻水藻細(xì)胞密度就是cell/ml）（以下的推理是建立在三級(jí)藻第二次加水和收獲的密度為105級(jí)）
若一天三級(jí)濃縮藻需求量為A升，則總藻細(xì)胞數(shù)目為K=A×10^3×（B×10^7）cell (K為A升濃縮藻所含的藻細(xì)胞數(shù)值，B為濃縮藻密度千萬(wàn)位的數(shù)值),一般情況下二級(jí)藻種的密度為C×10^6cell/ml(C為二級(jí)藻密度百萬(wàn)位的數(shù)值),若第一天接種E噸藻水，則一天需要二級(jí)藻種體積d=E×10^6×P×104/C×10^6=EP×10/C升，第三天加水F噸，此時(shí)加水后藻水密度E×10^6×Y×10^5/(E+F) ×10^6   cell/ml（Y為第三天加F噸水之前藻水密度十萬(wàn)位數(shù)值），然后第五天收獲時(shí)，藻池藻水藻細(xì)胞總數(shù)目應(yīng)為H=（E+F）×10^5×Z×10^6 (Z為藻池藻水密度十萬(wàn)位數(shù),H為藻池藻水藻細(xì)胞總數(shù)目)，因?yàn)榭傂枨罅康脑寮?xì)胞數(shù)目應(yīng)等于最后藻池藻水藻細(xì)胞總數(shù)目，則K=H,則     A×10^3×B×10^7     =（E+F）×10^6×Z×10^5經(jīng)過(guò)計(jì)算是A×B=(E+F) ×10×Z,
舉例：
若一天需濃縮藻320升，則A=320，(一般情況下E和F的值接近)，則因?yàn)镵=H,所以320×B=20EZ,即320B=20EZ，E=16B/Z,即B/Z噸藻池藻水可以收集濃縮藻20升(B為濃縮藻密度千萬(wàn)位的數(shù)值, Z為藻池藻水密度十萬(wàn)位數(shù))，即若一天需要濃縮藻A升，則每天應(yīng)接種E=AB÷20Z噸水。（Z和B的值應(yīng)經(jīng)過(guò)三級(jí)培養(yǎng)和收集藻水后才知道近似數(shù)值）
1—2高水位低密度接種（接種密度為P×10^4cell/ml,P為接種密度萬(wàn)位數(shù)值）（未特別說(shuō)明的藻水藻細(xì)胞密度就是cell/ml）（以下的推理是建立在三級(jí)藻第二次加水和收獲密度為10^6級(jí)）
   若一天三級(jí)濃縮藻需求量為A升，則總藻細(xì)胞數(shù)目為K=A×10^3×（B×10^7）cell (K為A升濃縮藻所含的藻細(xì)胞數(shù)值，B為濃縮藻密度千萬(wàn)位的數(shù)值),一般情況下二級(jí)藻種的密度為C×10^6cell/ml(C為二級(jí)藻密度百萬(wàn)位的數(shù)值),若一天接種E噸藻水，則一天需要二級(jí)藻種體積d=E×10^6×P×10^4/C×10^6=EP×10/C升，第三天加水F噸，此時(shí)加水后藻水密度E×10^6×Y×10^6/(E+F) ×10^6   cell/ml（Y為第三天加F噸水之前藻水密度百萬(wàn)位數(shù)值），然后第五天收獲時(shí)，藻池藻水藻細(xì)胞總數(shù)目應(yīng)為H=（E+F）×10^6×Z×10^6 (Z為藻池藻水密度百萬(wàn)位數(shù),H為藻池藻水藻細(xì)胞總數(shù)目)，因?yàn)榭傂枨罅康脑寮?xì)胞數(shù)目應(yīng)等于最后藻池藻水藻細(xì)胞總數(shù)目，則K=H,則     A×10^3×B×10^7     =（E+F）×10^6×Z×10^6經(jīng)過(guò)計(jì)算是A×B=(E+F) ×100×Z, (一般情況下E和F的值接近)，則近似AB=200EZ, 即若一天需要濃縮藻A升，則每天應(yīng)接種E=AB÷200Z噸水。（Z和B的值應(yīng)經(jīng)過(guò)三級(jí)培養(yǎng)和收集藻水后才知道近似數(shù)值）
2—1 低水位高密度接種（接種密度為P×10^5cell/ml,P為接種密度十萬(wàn)位數(shù)值）（未特別說(shuō)明藻水藻細(xì)胞密度就是cell/ml）（以下的推理是建立在三級(jí)藻第二次，第三次加水和收獲的密度為105級(jí)）
若一天三級(jí)濃縮藻需求量為A升，則總藻細(xì)胞數(shù)目為K=A×10^3×（B×10^7）cell (K為A升濃縮藻所含的藻細(xì)胞數(shù)值，B為濃縮藻密度千萬(wàn)位的數(shù)值),一般情況下二級(jí)藻種的密度為C×10^6cell/ml(C為二級(jí)藻密度百萬(wàn)位的數(shù)值),若第一天接種E噸藻水，則一天需要二級(jí)藻種體積d=E×10^6×P×10^5/C×10^6=EP×100/C升，第二天加水F噸，此時(shí)加水后藻水密度E×10^6×Y×10^5/(E+F) ×10^6cell/ml（Y為第二天加F噸水之前藻水密度十萬(wàn)位數(shù)值），然后第三天加水G噸 時(shí)，藻池藻水藻細(xì)胞密度應(yīng)為J=（E+F）×10^6×Z×10^5/      (E+F+G) ×10^6 (Z為藻池藻水密度十萬(wàn)位數(shù))，第四天或第五天收獲時(shí)，藻池藻水藻細(xì)胞總數(shù)目應(yīng)為H=（E+F+G）×10^6×W×10^5(W為藻池藻水密度十萬(wàn)位數(shù),H為藻池藻水藻細(xì)胞總數(shù)目)，因?yàn)榭傂枨罅康脑寮?xì)胞數(shù)目應(yīng)等于最后藻池藻水藻細(xì)胞總數(shù)目，
則K=H,則A×10^3×B×10^7   =（E+F+G）×10^6×W×10^5經(jīng)過(guò)計(jì)算是A×B=(E+F+G) ×10×W,
(一般情況下E, F,G的值接近)，則近似AB=30EW, 即若一天需要濃縮藻A升，則每天應(yīng)接種E=AB÷30W噸水。（W和B的值應(yīng)經(jīng)過(guò)三級(jí)培養(yǎng)和收集藻水后才知道近似數(shù)值）
2—2低水位高密度接種（接種密度為P×10^5cell/ml,P為接種密度十萬(wàn)位數(shù)值）（未特別說(shuō)明藻水藻細(xì)胞密度就是cell/ml）（以下的推理是建立在三級(jí)藻第二次，第三次加水和收獲的密度為10^6級(jí)）
若一天三級(jí)濃縮藻需求量為A升，則總藻細(xì)胞數(shù)目為K=A×10^3×（B×10^7）cell (K為A升濃縮藻所含的藻細(xì)胞數(shù)值，B為濃縮藻密度千萬(wàn)位的數(shù)值),一般情況下二級(jí)藻種的密度為C×10^6cell/ml(C為二級(jí)藻密度百萬(wàn)位的數(shù)值),若一天接種E噸藻水，則一天需要二級(jí)藻種體積d=E×10^6×P×10^5/C×10^6=EP×100/C升，第二天加水F噸，此時(shí)加水后藻水密度E×10^6×Y×10^6/(E+F) ×10^6   cell/ml（Y為第二天加F噸水之前藻水密度百萬(wàn)位數(shù)值），然后第三天加水G噸 時(shí)，藻池藻水藻細(xì)胞密度應(yīng)為J=（E+F）×10^6×Z×10^6/      (E+F+G) ×10^6 (Z為藻池藻水密度百萬(wàn)位數(shù))，第四天或第五天收獲時(shí)，藻池藻水藻細(xì)胞總數(shù)目應(yīng)為H=（E+F+G）×10^6×W×10^6   (W為藻池藻水密度百萬(wàn)位數(shù),H為藻池藻水藻細(xì)胞總數(shù)目)，因?yàn)榭傂枨罅康脑寮?xì)胞數(shù)目應(yīng)等于最后藻池藻水藻細(xì)胞總數(shù)目，
則K=H,則A×10^3×B×10^7   =（E+F+G）×10^6×W×10^6經(jīng)過(guò)計(jì)算是A×B=(E+F+G) ×10×W,
(一般情況下E, F,G的值接近)，則近似AB=300EW, 即若一天需要濃縮藻A升，則每天應(yīng)接種E=AB÷300W噸水。（W和B的值應(yīng)經(jīng)過(guò)實(shí)地三級(jí)培養(yǎng)和收集藻水后才知道近似數(shù)值）
作者: daoming4    時(shí)間: 2014-1-10 12:59
無(wú)私分享，非常感謝
作者: zjxenter    時(shí)間: 2014-1-10 15:21
哇塞 樓主大神 帖子好長(zhǎng)呀 膜拜
作者: 水寶寶    時(shí)間: 2014-1-10 23:24
沒(méi)有做過(guò)藻類培養(yǎng)，細(xì)菌培養(yǎng)倒是做過(guò)，想請(qǐng)教一下樓主，藻類定向擴(kuò)培，有沒(méi)有發(fā)現(xiàn)最佳的溫度，濃度，擴(kuò)培時(shí)間之類呢？
作者: pl35    時(shí)間: 2014-1-11 08:15
水寶寶 發(fā)表于 2014-1-10 23:24
沒(méi)有做過(guò)藻類培養(yǎng)，細(xì)菌培養(yǎng)倒是做過(guò)，想請(qǐng)教一下樓主，藻類定向擴(kuò)培，有沒(méi)有發(fā)現(xiàn)最佳的溫度，濃度，擴(kuò)培時(shí) ...

拿育苗常用的角毛藻為例，我操作時(shí)，一般保種室設(shè)置氣溫在22度，從純培養(yǎng)培養(yǎng)皿接種，一直到一級(jí)培養(yǎng)三角瓶都是此溫度，且是靜置培養(yǎng)。之后從500毫升瓶擴(kuò)培時(shí)開(kāi)始，就需要充氣培養(yǎng)，此時(shí)水溫如果在28度左右較好，超過(guò)33度藻類易老化。培養(yǎng)皿培養(yǎng)擴(kuò)種的時(shí)間一般在一星期，之后從培養(yǎng)皿挑出藻種于試管中，此階段，培養(yǎng)擴(kuò)培時(shí)間一般在4天左右，但也有超過(guò)1星期的。之后從試管擴(kuò)培一直到掛袋培養(yǎng)，一般以2天為一個(gè)周期（即接種下一環(huán)節(jié)），三級(jí)藻池?cái)U(kuò)培時(shí)間在3天到4天（視接種濃度而異）。一般接種濃度，培養(yǎng)皿涂布接種時(shí)，藻液濃度是百萬(wàn)級(jí)的，藻液用量以涂布滿培養(yǎng)基表面但不過(guò)于濕為宜。此后從試管培養(yǎng)一直到三級(jí)培養(yǎng)，接種密度，我使用的一般為萬(wàn)級(jí)（當(dāng)然，密度越高越好，縮短培養(yǎng)時(shí)間，但也需看藻種的存量，從中找到平衡點(diǎn)）。
作者: 水寶寶    時(shí)間: 2014-1-11 08:56
pl35 發(fā)表于 2014-1-11 08:15
拿育苗常用的角毛藻為例，我操作時(shí)，一般保種室設(shè)置氣溫在22度，從純培養(yǎng)培養(yǎng)皿接種，一直到一級(jí)培養(yǎng)三角 ...

那會(huì)不會(huì)對(duì)培養(yǎng)皿上的藻種做提純優(yōu)化？您覺(jué)得有沒(méi)有必要做優(yōu)化？

作者: 煙花雨    時(shí)間: 2014-1-11 09:49
“對(duì)蝦種苗企業(yè)的生存主要是依靠蝦苗養(yǎng)殖效果來(lái)決定的，蝦苗成活率的高低直接影響著產(chǎn)業(yè)鏈的上上下下。”

嚴(yán)重同意！！！！！
作者: syusuke    時(shí)間: 2014-1-11 10:08
@liaowang738 @蟲(chóng)子的悲哀 @匪兵從良 @kanhai @蝦兵魚(yú)將 @云之海 @胡路怡 @冰山 @龍?jiān)诮?/a> @養(yǎng)蝦人
各位對(duì)蝦圈的好朋友們，@pl35 繼【南美白對(duì)蝦蝦苗檢測(cè)圖解】和【南美白對(duì)蝦幼體檢測(cè)圖片及相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)劃分 】之后 又發(fā)布最新原創(chuàng)精彩內(nèi)容，請(qǐng)大家多多支持，多多交流哦！！！！

你的回帖是樓主發(fā)帖的動(dòng)力哇！
作者: syusuke    時(shí)間: 2014-1-11 10:08
小編先頂一個(gè)！！！{:soso_e163:}
作者: syusuke    時(shí)間: 2014-1-11 10:09
其他的親們，加油哈！！！！


作者: 知行合一    時(shí)間: 2014-1-11 10:12
寫(xiě)的不錯(cuò)！！  我也學(xué)小編  推薦給以下高手
@天涯游蝦  @浪跡天涯  @江湖游蝦  @拜耳劉濤  @新南美白  @cuiluosheng   @haoye520  @海水駱駝   @海上積雨云   @黃爵
作者: 知行合一    時(shí)間: 2014-1-11 10:13
好帖，留個(gè)記號(hào)！

方便以后回來(lái)看

作者: apldwf    時(shí)間: 2014-1-11 10:47
{:soso_e179:}{:soso_e183:}
作者: 軍臨天下    時(shí)間: 2014-1-11 10:53
無(wú)私奉獻(xiàn)啊，這個(gè)還真不會(huì)，學(xué)習(xí)了。
作者: pl35    時(shí)間: 2014-1-11 18:38
水寶寶 發(fā)表于 2014-1-11 08:56
那會(huì)不會(huì)對(duì)培養(yǎng)皿上的藻種做提純優(yōu)化？您覺(jué)得有沒(méi)有必要做優(yōu)化？

應(yīng)該優(yōu)化，比如第一次采用涂布法，培養(yǎng)基上面的藻種比較雜或混有雜菌或者藻種質(zhì)量差異明顯，選取所需要的較好的藻種，再進(jìn)行劃線擴(kuò)培，提純。
作者: 日記ˉ逗    時(shí)間: 2014-1-11 19:19
pl35 發(fā)表于 2014-1-10 10:31
說(shuō)明： 10的2次方標(biāo)示成10^2，以下數(shù)字的次方通用此表示法

三級(jí)藻生產(chǎn)

真有文化。
作者: 米奇    時(shí)間: 2014-1-12 10:58
看看有收獲
作者: 水寶寶    時(shí)間: 2014-1-12 14:39
pl35 發(fā)表于 2014-1-11 18:38
應(yīng)該優(yōu)化，比如第一次采用涂布法，培養(yǎng)基上面的藻種比較雜或混有雜菌或者藻種質(zhì)量差異明顯，選取所需要的 ...

再請(qǐng)教樓主一個(gè)問(wèn)題，器型對(duì)于藻類擴(kuò)培有影響或差異嗎？主要是指三級(jí)擴(kuò)培
作者: zjsxyjf20113    時(shí)間: 2014-1-12 15:43
精品文章 啊
作者: 一葉知秋    時(shí)間: 2014-1-13 06:37
好像科研啊，生產(chǎn)中不實(shí)用啊
作者: pl35    時(shí)間: 2014-1-13 08:20
一葉知秋 發(fā)表于 2014-1-13 06:37
好像科研啊，生產(chǎn)中不實(shí)用啊

上述除了《三級(jí)藻生產(chǎn)》這塊的藻液用量推理說(shuō)明屬于選擇性掌握。三級(jí)藻這塊，如果苗場(chǎng)只是做三級(jí)擴(kuò)培，那么可以簡(jiǎn)化成接種比例，加上按照育苗所需的藻液量來(lái)循環(huán)擴(kuò)培即可。
但如果是做單胞藻純培養(yǎng)，上述的保種，提純，擴(kuò)培程序，消毒衛(wèi)生環(huán)節(jié)，儀器使用都是應(yīng)該掌握的。育苗所需的藻類投喂要求較高，雜藻少，藻液雜菌含量不超標(biāo)，藻種質(zhì)量好，在育苗生產(chǎn)上，單胞藻作為苗的開(kāi)口餌料所使用的一般是角毛藻，但經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)雜藻污染的情況，且許多雜藻對(duì)于育苗早期并無(wú)多大幫助且與角毛藻競(jìng)爭(zhēng)營(yíng)養(yǎng)鹽攝取，所以這時(shí)就應(yīng)該進(jìn)行提純，獲得優(yōu)質(zhì)的藻種，再保存好藻種，維持育苗藻類生產(chǎn)的動(dòng)態(tài)平衡
作者: pl35    時(shí)間: 2014-1-13 08:30
水寶寶 發(fā)表于 2014-1-12 14:39
再請(qǐng)教樓主一個(gè)問(wèn)題，器型對(duì)于藻類擴(kuò)培有影響或差異嗎？主要是指三級(jí)擴(kuò)培

育苗生產(chǎn)上，三級(jí)培養(yǎng)目前大多是室內(nèi)敞池培養(yǎng)或者室內(nèi)掛袋培養(yǎng)，后者由于藻袋近似密封，光照條件充足，水溫易保持等優(yōu)勢(shì)，受外界環(huán)境生物的威脅小，所以優(yōu)于前者。但在相同的時(shí)間內(nèi)，敞池一次性培養(yǎng)的藻液量則遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于掛袋培養(yǎng)，且占用的室內(nèi)空間遠(yuǎn)小于掛袋培養(yǎng)，所占用的時(shí)間也僅多1到2天時(shí)間。育苗生產(chǎn)所需的藻液量較多的話，室內(nèi)敞池培養(yǎng)是必須的。
作者: 水寶寶    時(shí)間: 2014-1-13 09:57
一葉知秋 發(fā)表于 2014-1-13 06:37
好像科研啊，生產(chǎn)中不實(shí)用啊

實(shí)際的生產(chǎn)中也應(yīng)該是這么做才行。

我見(jiàn)過(guò)有的師傅從保存藻種的培養(yǎng)瓶里直接加到室外培育池，培養(yǎng)一兩周，也能長(zhǎng)出一池的藻來(lái)，但里面有沒(méi)有雜藻，藻的純度多少，很難知道，往往是依據(jù)經(jīng)驗(yàn)來(lái)判斷，不可控。
作者: 水寶寶    時(shí)間: 2014-1-13 10:02
我看很多苗企都是用桶裝水的桶子來(lái)擴(kuò)陪20L的藻，這個(gè)效果是不是一樣呢？
作者: syusuke    時(shí)間: 2014-1-13 10:03
本帖最后由 syusuke 于 2014-1-13 10:05 編輯

看得出，樓主做事很認(rèn)真。

也不知道蝦苗場(chǎng)現(xiàn)在能夠堅(jiān)持這樣育苗的企業(yè)還有幾家………………

今年的蝦苗啊~~~~~~~~~~唉
作者: syusuke    時(shí)間: 2014-1-13 10:06

高手，你們?cè)覆辉敢馔瑯侵鹘涣饕幌履兀繕侵鞲嬖V小編，他辛苦整理的目的，就是想與大家交流探討呦~~

你的回帖是樓主發(fā)帖的動(dòng)力呢！

作者: 牧心    時(shí)間: 2014-1-13 13:26
藻類營(yíng)養(yǎng)對(duì)蝦苗很重要。我想知道是不是現(xiàn)在每家苗場(chǎng)都自己培養(yǎng)藻類呢？因?yàn)楝F(xiàn)在有很多藻類的微粒子飼料替代品，但是我覺(jué)得天然的藻類還是不可或缺的，樓主什么看法？
作者: zjsxyjf20113    時(shí)間: 2014-1-13 16:23
看看有收獲
作者: 煙花雨    時(shí)間: 2014-1-14 09:22
路過(guò)，頂！！！不明覺(jué)厲！
作者: 阿爾戈上水手    時(shí)間: 2014-1-14 15:40
請(qǐng)問(wèn)樓主，三級(jí)擴(kuò)培哪個(gè)方式比較好哈，低水位高密度？高水位低密度？還是低水位低密度？有木有實(shí)際生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)可以交流一下的
作者: 煙花雨    時(shí)間: 2014-1-14 17:04
呦，32樓又來(lái)了一位內(nèi)行，歡迎歡迎
作者: 水寶寶    時(shí)間: 2014-1-15 00:25
桶的成本是不是低些？

作者: zhuyuming    時(shí)間: 2014-1-15 07:57
樓主說(shuō)的詳細(xì)具體專業(yè)，如果是培養(yǎng)角毛藻就要像樓主介紹的一樣需要專業(yè)人士專人培養(yǎng)，如果是骨條藻就很簡(jiǎn)單了，基本只需要三級(jí)就可以了，我們以前就是用骨條藻投喂，不過(guò)效果不好，特別需要注意的是陪藻水不要進(jìn)入育苗池，據(jù)說(shuō)角毛藻比骨條藻更適合蝦苗培育
作者: 魚(yú)中劍    時(shí)間: 2014-1-15 09:59
藻種保存環(huán)節(jié)比較嚴(yán)格是絕對(duì)必要的，如果有可能的話，育苗密集區(qū)（如東海島）可以由大企業(yè)牽頭弄個(gè)水產(chǎn)藻種的種質(zhì)庫(kù)，做藻種收集、傳代和小培，向內(nèi)外單位有償提供各種微藻種液。當(dāng)然，如果有實(shí)力，可以搞個(gè)大型的微藻生產(chǎn)基地提供濃縮藻液，那就完美了。
苗場(chǎng)自行配備二級(jí)、三級(jí)培藻設(shè)施，這塊的無(wú)菌要求可以低點(diǎn)，至于用什么設(shè)施，看各個(gè)苗場(chǎng)的情況各顯神通吧，塑料袋也好，水桶也好，敞池也好，目前規(guī)模化培養(yǎng)的跑道池也好，看自身的土地、資金和人才實(shí)力了。
培養(yǎng)出來(lái)的有沒(méi)有雜藻我認(rèn)為問(wèn)題到不是很大，現(xiàn)場(chǎng)的水處理控制好，這種問(wèn)題會(huì)少很多。進(jìn)雜藻只要不是藍(lán)藻類一般不怕，即使有，量也不會(huì)多，對(duì)蝦苗的不利影響也不會(huì)大。原生動(dòng)物控制好，這個(gè)要出現(xiàn)，是可能導(dǎo)致倒藻池的。
三級(jí)培養(yǎng)，把握好源頭管理（池、水），室外培養(yǎng)控制好溫度；接種密度相對(duì)高一點(diǎn)（10%~20%以上），這樣成活的幾率大；如果有條件，補(bǔ)點(diǎn)二氧化碳。
這塊的東西，真是千頭萬(wàn)緒，如某兄弟說(shuō)的，難度不下于育蝦苗。
作者: pl35    時(shí)間: 2014-1-15 13:00
牧心 發(fā)表于 2014-1-13 13:26
藻類營(yíng)養(yǎng)對(duì)蝦苗很重要。我想知道是不是現(xiàn)在每家苗場(chǎng)都自己培養(yǎng)藻類呢？因?yàn)楝F(xiàn)在有很多藻類的微粒子飼料替代 ...

投喂單胞藻與不投喂的區(qū)別還是有的，比如苗的變態(tài)時(shí)間縮短，活力個(gè)頭大小，水質(zhì)均優(yōu)于未投喂單胞藻的苗。
但有時(shí)會(huì)遇見(jiàn)藻類質(zhì)量不好，此時(shí)就不能按正常的藻類投喂量，否則容易導(dǎo)致水體出現(xiàn)各種不良的變化，適時(shí)將人工微粒料結(jié)合，避免投喂藻類所帶來(lái)的負(fù)面影響。當(dāng)然，如果藻類質(zhì)量好，按照正投喂量投喂到蚤狀期后期，再開(kāi)始添加人工微粒料和豐年蟲(chóng)即可。但需注意的是，不同的育苗水體所承受的環(huán)境負(fù)載是不一樣，適時(shí)結(jié)合吧。
作者: pl35    時(shí)間: 2014-1-15 13:11
阿爾戈上水手 發(fā)表于 2014-1-14 15:40
請(qǐng)問(wèn)樓主，三級(jí)擴(kuò)培哪個(gè)方式比較好哈，低水位高密度？高水位低密度？還是低水位低密度？有木有實(shí)際生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn) ...

根據(jù)三級(jí)藻池的容量及二級(jí)藻種的生產(chǎn)量及育苗所需量等來(lái)選擇。如果三級(jí)藻池水體較小，我采用的是一次性注滿池，添加二級(jí)藻種，視天氣情況，正常的話，3天到4天即可收獲。如果三級(jí)藻池容量較大，如果采用一次性注滿水的話，二級(jí)藻種供應(yīng)的壓力就大，此時(shí)采用的就是先加水體容量百分之20左右（此比例可大可小，視情況而定），再添加二級(jí)藻種，培養(yǎng)2天時(shí)間，再添加配好營(yíng)養(yǎng)鹽的海水滿池，培養(yǎng)藻水濃度達(dá)到所需后，即可收獲。
作者: pl35    時(shí)間: 2014-1-15 13:13
水寶寶 發(fā)表于 2014-1-15 00:25
桶的成本是不是低些？

掛袋培養(yǎng)確實(shí)消耗聚乙烯袋，桶的話使用時(shí)間長(zhǎng)。
作者: pl35    時(shí)間: 2014-1-15 13:20
魚(yú)中劍 發(fā)表于 2014-1-15 09:59
藻種保存環(huán)節(jié)比較嚴(yán)格是絕對(duì)必要的，如果有可能的話，育苗密集區(qū)（如東海島）可以由大企業(yè)牽頭弄個(gè)水產(chǎn)藻種 ...

很好，不過(guò)這還得育苗技術(shù)員的支持才可以
作者: 魚(yú)中劍    時(shí)間: 2014-1-15 13:35
pl35 發(fā)表于 2014-1-15 13:20
很好，不過(guò)這還得育苗技術(shù)員的支持才可以

老板支持才行
作者: 米奇    時(shí)間: 2014-1-15 17:06
zhuyuming 發(fā)表于 2014-1-15 07:57
樓主說(shuō)的詳細(xì)具體專業(yè)，如果是培養(yǎng)角毛藻就要像樓主介紹的一樣需要專業(yè)人士專人培養(yǎng)，如果是骨條藻就很簡(jiǎn)單 ...

骨條藻，看到朋友將骨條藻用撈網(wǎng)撈起來(lái)后，用料袋搓碎后給蝦吃的
作者: 白卿    時(shí)間: 2014-1-15 22:22
很好很強(qiáng)大的一個(gè)帖，對(duì)藻類培養(yǎng)早就想了解，今日尋得此帖，又增長(zhǎng)不少知識(shí)。謝謝樓主無(wú)私分享！
作者: zhuyuming    時(shí)間: 2014-1-16 07:45
米奇 發(fā)表于 2014-1-15 17:06
骨條藻，看到朋友將骨條藻用撈網(wǎng)撈起來(lái)后，用料袋搓碎后給蝦吃的

是的，當(dāng)時(shí)我們就是撈起來(lái)，消毒，料袋搓碎投喂，效果不好
作者: 魚(yú)中劍    時(shí)間: 2014-1-16 09:05
本帖最后由 魚(yú)中劍 于 2014-1-16 18:19 編輯

附一個(gè)海洋所逄少軍老師編的材料,供參考

單胞藻技術(shù)規(guī)范-逄少軍.doc

97 KB, 下載次數(shù): 39
作者: 煙花雨    時(shí)間: 2014-1-16 09:43
zhuyuming 發(fā)表于 2014-1-16 07:45
是的，當(dāng)時(shí)我們就是撈起來(lái)，消毒，料袋搓碎投喂，效果不好

后來(lái)找到原因了么？
作者: 魚(yú)中劍    時(shí)間: 2014-1-16 18:20
煙花雨 發(fā)表于 2014-1-16 09:43
后來(lái)找到原因了么？

破碎之后，細(xì)胞都破了，營(yíng)養(yǎng)跑很多，還污染水
作者: pl35    時(shí)間: 2014-1-18 11:04
pl35 發(fā)表于 2014-1-13 08:30
育苗生產(chǎn)上，三級(jí)培養(yǎng)目前大多是室內(nèi)敞池培養(yǎng)或者室內(nèi)掛袋培養(yǎng)，后者由于藻袋近似密封，光照條件充足，水 ...

藻類培養(yǎng)的成功與否一個(gè)重要的點(diǎn)就是預(yù)防外界微生物的污染，所以整個(gè)培養(yǎng)過(guò)程，都應(yīng)該盡量減少藻液與外界的接觸，所以生產(chǎn)上利用錫箔紙或牛皮紙來(lái)包扎容器口，也是如此。
有的二級(jí)培養(yǎng)采用生活中常用的水桶，這種沒(méi)有包扎容器口的二級(jí)培養(yǎng)，前提是室內(nèi)衛(wèi)生消毒環(huán)節(jié)做好
作者: pl35    時(shí)間: 2014-1-18 11:06
魚(yú)中劍 發(fā)表于 2014-1-16 09:05
附一個(gè)海洋所逄少軍老師編的材料,供參考

，感謝您，學(xué)習(xí)了
作者: liaowang738    時(shí)間: 2014-1-18 20:03
普通人只能看看了解下，一般用不上或不會(huì)用，資料不錯(cuò)，贊
作者: 海上積雨云    時(shí)間: 2014-1-20 08:52
確實(shí)專業(yè)，就不知道是哪家公司的技術(shù)資料？
作者: pl35    時(shí)間: 2014-1-21 08:06
海上積雨云 發(fā)表于 2014-1-20 08:52
確實(shí)專業(yè)，就不知道是哪家公司的技術(shù)資料？

前輩你好，這是本人在領(lǐng)導(dǎo)的授業(yè)下所寫(xiě)的總結(jié)。此次發(fā)表主要是進(jìn)行單胞藻培養(yǎng)的技術(shù)交流，另如果有志于從事單胞藻行業(yè)的朋友給予一定的理論基礎(chǔ)。
作者: pl35    時(shí)間: 2014-1-21 08:39

補(bǔ)充一下此文
保種環(huán)節(jié)
常用的是固體保種和液體保種，據(jù)觀察的情況，固體保種明顯優(yōu)于液體保種，本人在液體常溫保種時(shí)，在無(wú)菌環(huán)境下的操作也只能擴(kuò)培4次左右，之后就會(huì)遇到藻種生長(zhǎng)緩慢，鏡檢也無(wú)雜藻或其它微生物的影響。

固體保種
擴(kuò)培的次數(shù)與藻種數(shù)直接相關(guān)，這里要說(shuō)的是固體保種相關(guān)的保存問(wèn)題。培養(yǎng)基的水分含量直接影響到后期的保種時(shí)間。做純培養(yǎng)時(shí)，高壓滅菌后，都會(huì)將培養(yǎng)基放置于超凈工作臺(tái)上風(fēng)干一陣，此環(huán)節(jié)本人做過(guò)試驗(yàn)，就是培養(yǎng)皿的皿蓋是否蓋上的問(wèn)題，如果蓋上會(huì)導(dǎo)致水分蒸發(fā)緩慢或在皿蓋上凝結(jié)成水珠，這樣的話風(fēng)干的效果會(huì)較差；如果不蓋住，此時(shí)就對(duì)超凈工作臺(tái)的無(wú)菌環(huán)境要求極高，因?yàn)楸救税凑展ぷ髋_(tái)的消毒程序，工作臺(tái)經(jīng)歷酒精消毒，紫外線燈照射數(shù)十分鐘的程序后，無(wú)蓋吹干培養(yǎng)基，但導(dǎo)致的后果卻是后期培養(yǎng)基長(zhǎng)出大量的雜菌（培養(yǎng)基經(jīng)過(guò)高壓滅菌，無(wú)菌封口膜封口），所以后來(lái)本人試著將皿蓋僅留一個(gè)縫隙，風(fēng)干效果也行，也可以減少雜菌污染的機(jī)率。
保存問(wèn)題，長(zhǎng)出藻種的培養(yǎng)皿可以用保鮮膜或者錫箔紙包裹好，放入冰箱冷藏室，在低溫弱光的環(huán)境下緩慢生長(zhǎng)。此時(shí)需注意的是，如果冷藏一陣后，由于接種需要將培養(yǎng)皿拿出冷藏室，要注意的是由于溫差導(dǎo)致的培養(yǎng)基水分的蒸發(fā)，導(dǎo)致培養(yǎng)基上滲出水珠，影響藻種的生長(zhǎng)。
作者: 魚(yú)中劍    時(shí)間: 2014-1-21 16:37
pl35 發(fā)表于 2014-1-18 11:04
藻類培養(yǎng)的成功與否一個(gè)重要的點(diǎn)就是預(yù)防外界微生物的污染，所以整個(gè)培養(yǎng)過(guò)程，都應(yīng)該盡量減少藻液與外界 ...

錫箔封口不好，不透氣
作者: 阿爾戈上水手    時(shí)間: 2014-1-25 09:46
pl35 發(fā)表于 2014-1-15 13:11
根據(jù)三級(jí)藻池的容量及二級(jí)藻種的生產(chǎn)量及育苗所需量等來(lái)選擇。如果三級(jí)藻池水體較小，我采用的是一次性注 ...

有加新水的話，營(yíng)養(yǎng)鹽是按總水體的量加還是新水的量加哈？這個(gè)省錢很關(guān)鍵
作者: 百戰(zhàn)老兵    時(shí)間: 2014-1-25 23:44
樓主是單胞藻培養(yǎng)
作者: 百戰(zhàn)老兵    時(shí)間: 2014-1-26 00:30
樓主是個(gè)有心人，做得不錯(cuò)，單胞藻培養(yǎng)不但育蝦苗需要，育魚(yú)苗也缺不得，特別是輪蟲(chóng)的培養(yǎng)少不得。相信在養(yǎng)成階段也會(huì)大放異彩，例如廣東海大水院黃翔鵠教授堪稱大師，定向培藻理論和實(shí)踐都相當(dāng)成熟。魚(yú)中劍36樓建議非常好【育苗密集區(qū)（如東海島）可以由企業(yè)或科研機(jī)構(gòu)甚至相關(guān)協(xié)會(huì)，牽頭弄個(gè)水產(chǎn)藻種的種質(zhì)庫(kù)，做藻種收集、傳代和小培，向內(nèi)外單位有償提供各種微藻種液。當(dāng)然，如果有實(shí)力，可以搞個(gè)大型的微藻生產(chǎn)基地提供濃縮藻液，那就完美了】。苗場(chǎng)或養(yǎng)殖場(chǎng)做三級(jí)擴(kuò)培，，硬件和技術(shù)要求不高，方便，易得，簡(jiǎn)單，是不是很有潛力？
作者: pl35    時(shí)間: 2014-1-26 10:24
魚(yú)中劍 發(fā)表于 2014-1-21 16:37
錫箔封口不好，不透氣

目前來(lái)看，錫箔紙封口三角瓶（規(guī)格100到250毫升），靜置培養(yǎng)一般兩天到三天就可以達(dá)到百萬(wàn)級(jí)的藻細(xì)胞濃度，達(dá)到接種下一級(jí)的條件。而從500毫升體積以上容積的培養(yǎng)器具起，充氣培養(yǎng)，錫箔紙只是封住瓶口部，通氣管插入充氣即可。
作者: pl35    時(shí)間: 2014-1-26 10:25
阿爾戈上水手 發(fā)表于 2014-1-25 09:46
有加新水的話，營(yíng)養(yǎng)鹽是按總水體的量加還是新水的量加哈？這個(gè)省錢很關(guān)鍵

按照新水的量添加營(yíng)養(yǎng)鹽
作者: pl35    時(shí)間: 2014-1-26 10:33
百戰(zhàn)老兵 發(fā)表于 2014-1-26 00:30
樓主是個(gè)有心人，做得不錯(cuò)，單胞藻培養(yǎng)不但育蝦苗需要，育魚(yú)苗也缺不得，特別是輪蟲(chóng)的培養(yǎng)少不得。相信在養(yǎng) ...

這個(gè)方法，本人認(rèn)為實(shí)現(xiàn)的難度很大。如果技術(shù)員能很好的使用藻液且實(shí)實(shí)在在的保證提高了成活率，相信苗場(chǎng)老板應(yīng)當(dāng)會(huì)支持這個(gè)構(gòu)想。但每個(gè)技術(shù)員的操作手法不同，有的技術(shù)員不想或不懂用藻，真實(shí)的需求量估計(jì)不大，就算愿意使用，一旦效果不好（或許不是因?yàn)樵孱惒缓玫脑颍逡罕毁|(zhì)疑的聲音絕對(duì)不會(huì)小，一旦被質(zhì)疑，其以后的使用量就很難說(shuō)，畢竟育苗成活率，誰(shuí)都難以保證
作者: w8210    時(shí)間: 2014-2-3 00:45
好帖，留個(gè)記號(hào)！

方便以后回來(lái)看
作者: 煙花雨    時(shí)間: 2014-2-11 12:05
w8210 發(fā)表于 2014-2-3 00:45
好帖，留個(gè)記號(hào)！

方便以后回來(lái)看

很有眼光！！！
作者: pl35    時(shí)間: 2014-2-11 12:59
本帖最后由 pl35 于 2014-2-11 13:04 編輯

本人整理了一些三級(jí)藻生產(chǎn)上的方法，不足之處，還請(qǐng)指正交流
三級(jí)藻生產(chǎn)
三級(jí)藻系統(tǒng)包括用水處理以及配送，藻種的供應(yīng)，溫度與光照控制等。為確保擴(kuò)大培養(yǎng)成功，從接種到收獲的培養(yǎng)時(shí)間應(yīng)該盡量縮短，以避免因?yàn)殚_(kāi)放式培養(yǎng)隨培養(yǎng)規(guī)模擴(kuò)大接觸外界感染源時(shí)間加長(zhǎng)，三級(jí)藻池滋生過(guò)多的有害生物，使三級(jí)培養(yǎng)失敗。

1 三級(jí)藻用水水處理可采用三種水處理,
　　A處理：符合水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)的海水處理。
　　B 和C處理：海區(qū)狀況較差的海水處理
　　　A處理
　　沙井→海區(qū)供水泵→沉淀池→消毒池（10ppm的有效氯），曝氣48小時(shí)以上→兩組（每組各2個(gè)沙缸串聯(lián)）并聯(lián)的反沖式沙缸過(guò)濾器(沙缸每次使用都要反沖,要讓沙子流化,定期消毒更換沙子)→高位蓄水池→自動(dòng)供水系統(tǒng)專用管道→過(guò)濾袋→三級(jí)藻池
　　　
　　　
B處理
沙井→海區(qū)供水泵→黑暗沉淀池→消毒池(有效氯15ppm)，曝氣48小時(shí)以上，沉降及檢測(cè)中和余氯→反沖式沙缸過(guò)濾器(沙缸每次使用都要反沖,要讓沙子流化,定期消毒更換沙子)→泡沫分離器(有必要的話可將臭氧注入泡沫分離機(jī)中)→ 紫外線燈過(guò)濾器→高位蓄水池→自動(dòng)供水系統(tǒng)專用管道→過(guò)濾袋→三級(jí)藻池
C處理
沙井→海區(qū)供水泵→黑暗沉淀池→消毒池(有效氯15ppm)，曝氣48小時(shí)以上，沉降及檢測(cè)中和余氯→二級(jí)沙濾高位蓄水池→供水泵→反沖式沙缸過(guò)濾器→泡沫分離器(有必要的話可將臭氧注入泡沫分離機(jī)中)→紫外線燈過(guò)濾器→過(guò)濾袋→三級(jí)藻池
A處理最經(jīng)濟(jì)，但要求海區(qū)水質(zhì)良好。
B處理造價(jià)稍高，消毒徹底，但消毒劑用量較大，處理水時(shí)間較長(zhǎng)。C處理造價(jià)最高，增加了二級(jí)沙濾蓄水池，但根據(jù)水質(zhì)條件可以靈活增減水處理設(shè)備的使用（如果水質(zhì)良好，則二級(jí)沙濾高位蓄水池的水直接通過(guò)自動(dòng)供水系統(tǒng)進(jìn)入三級(jí)藻池）。

2  三級(jí)藻培養(yǎng)方式
采用一次性開(kāi)放式充氣培養(yǎng)，即：建立24小時(shí)充氣系統(tǒng)，當(dāng)藻細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖達(dá)到所需的密度時(shí)，一次性全部收獲或一次性全部用于擴(kuò)種，藻池所在空間一般采用棚式頂架覆蓋白色薄膜或者是頂部覆蓋PVC透明瓦的水泥磚房。
3  三級(jí)接種要求
接種時(shí)應(yīng)檢查二級(jí)藻種，所用藻種液必須是藻細(xì)胞生長(zhǎng)良好，密度大，細(xì)胞形狀正常，無(wú)附壁，無(wú)泡沫，無(wú)原生動(dòng)物，色澤正常方可使用。將二級(jí)藻種與營(yíng)養(yǎng)液按不低于1:40的比例接種于三級(jí)培養(yǎng)池中培養(yǎng)，當(dāng)然接種密度越高越好，但也需要考慮二級(jí)藻種的存量，從中找到平衡點(diǎn)，接種時(shí)間盡量在早上8點(diǎn)到10點(diǎn)之間。

4 三級(jí)培養(yǎng)的日常管理
(1)調(diào)節(jié)溫度
定時(shí)檢查藻液溫度，使其盡量保持在最適范圍內(nèi)。可用鍋爐加溫、通風(fēng)等方法調(diào)節(jié)溫度。
(2)調(diào)節(jié)光照強(qiáng)度
在白天用在藻池上方加蓋薄膜調(diào)節(jié)光照強(qiáng)度，夜晚應(yīng)使用光照設(shè)備，可按每個(gè)藻池配置一個(gè)300到500瓦的防水碘鎢燈（視三級(jí)藻池容量），使光照強(qiáng)度盡量保持在最適范圍內(nèi)。
(3)觀察生長(zhǎng)狀況
每日肉眼和鏡檢觀察藻液，如果發(fā)現(xiàn)泡沫過(guò)多，附壁明顯，沉淀多且不呈霧狀散開(kāi)，原生動(dòng)物繁殖過(guò)快，藻液變清等不良情況，應(yīng)及時(shí)采取相應(yīng)措施。
(4)三級(jí)藻二次擴(kuò)種或收獲
（4-1 ) 二次擴(kuò)種：上一級(jí)接種后培養(yǎng)2天，經(jīng)檢查藻種良好生長(zhǎng)的，即繼續(xù)添加配好營(yíng)養(yǎng)鹽的海水進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，由于已經(jīng)在開(kāi)放式容器中培養(yǎng)一段時(shí)間，可能存在的外界污染機(jī)率加大，為了縮短培養(yǎng)時(shí)間，所以二次擴(kuò)種的接種比例應(yīng)加大，建議接種比例不低于1:7。
（4-2) 收獲藻液：采收的藻液應(yīng)是經(jīng)檢查藻細(xì)胞生長(zhǎng)良好，密度大，細(xì)胞形狀正常，少或無(wú)附壁，極少或無(wú)泡沫，極少或無(wú)原生動(dòng)物，色澤正常，弧菌檢測(cè)合格后方可使用。


   
作者: 百戰(zhàn)老兵    時(shí)間: 2014-2-11 15:33
馬到成功，新春如意！
作者: 遼河里的小魚(yú)    時(shí)間: 2014-2-17 09:18
學(xué)習(xí)了 樓主辛苦了
作者: 白慕水    時(shí)間: 2014-2-17 15:42
相當(dāng)?shù)脑攲?shí)，贊一個(gè)
好貼必須頂起
讓更多人看到
作者: maomao_80    時(shí)間: 2014-3-4 16:45
好好學(xué)習(xí)了
作者: 龍蝦    時(shí)間: 2014-3-4 17:05
原來(lái)這樣培啊，學(xué)習(xí)了
作者: 晨雨    時(shí)間: 2014-3-4 19:10
非常不錯(cuò)的資料，支持了
作者: 飄遙    時(shí)間: 2014-3-4 20:22
樓主是哪個(gè)公司的。
作者: hyaha    時(shí)間: 2014-8-27 23:55
無(wú)私分享，感謝
作者: →☆醉__ㄨ了    時(shí)間: 2014-9-12 11:36
非常不錯(cuò)，想學(xué)習(xí)一下
作者: 任我行    時(shí)間: 2014-9-12 18:42
好資料！蝦苗需要連續(xù)不斷的藻液，如何連續(xù)培育藻液？
作者: pl35    時(shí)間: 2014-9-12 19:10
任我行 發(fā)表于 2014-9-12 18:42
好資料！蝦苗需要連續(xù)不斷的藻液，如何連續(xù)培育藻液？

建立保種純培養(yǎng)室，定期提純，擴(kuò)培。關(guān)鍵是要保好藻種，擴(kuò)培按照流程化操作即可
作者: 任我行    時(shí)間: 2014-9-21 16:26
本帖最后由 一片云 于 2014-9-22 08:40 編輯

擴(kuò)培流程化可否如下如圖操作：

水產(chǎn)前沿網(wǎng)
作者: pl35    時(shí)間: 2014-9-27 13:24
任我行 發(fā)表于 2014-9-21 16:26
擴(kuò)培流程化可否如下如圖操作：

可行，但關(guān)鍵是藻種供應(yīng)，這是連續(xù)培養(yǎng)的基礎(chǔ)
作者: 中海院新兵    時(shí)間: 2015-5-15 09:42
學(xué)習(xí)當(dāng)中，有用的資料
作者: zhangweijie5217    時(shí)間: 2015-6-27 16:49
學(xué)習(xí)了，樓主辛苦！
作者: 大蝦熊    時(shí)間: 2015-6-27 21:16
樓主應(yīng)該是海壹苗場(chǎng)的人吧，謝謝你分享資料，你們能這樣做，說(shuō)明你們老總眼光獨(dú)到，剩下的就是執(zhí)行力了，如果你們每一個(gè)苗場(chǎng)都能這樣做，那恭喜你們，你們遲早是中國(guó)苗企的老大。
作者: 牧陽(yáng)長(zhǎng)青    時(shí)間: 2016-8-22 21:58
pl35 發(fā)表于 2014-1-15 13:00
投喂單胞藻與不投喂的區(qū)別還是有的，比如苗的變態(tài)時(shí)間縮短，活力個(gè)頭大小，水質(zhì)均優(yōu)于未投喂單胞藻的苗。 ...

投喂藻類所帶來(lái)的負(fù)面影響一般會(huì)有哪些？
作者: 牧陽(yáng)長(zhǎng)青    時(shí)間: 2016-8-22 21:59
魚(yú)中劍 發(fā)表于 2014-1-15 09:59
藻種保存環(huán)節(jié)比較嚴(yán)格是絕對(duì)必要的，如果有可能的話，育苗密集區(qū)（如東海島）可以由大企業(yè)牽頭弄個(gè)水產(chǎn)藻種 ...

感覺(jué)好專業(yè)的回答，，原生動(dòng)物對(duì)藻類的危害這么大的嗎？
作者: 江東    時(shí)間: 2016-8-22 22:43
棒棒棒棒棒棒
作者: pl35    時(shí)間: 2016-9-4 15:18
本帖最后由 pl35 于 2016-9-4 15:25 編輯
牧陽(yáng)長(zhǎng)青 發(fā)表于 2016-8-22 21:58
投喂藻類所帶來(lái)的負(fù)面影響一般會(huì)有哪些？

需要把藻類濃度（藻細(xì)胞密度）和幼體密度，狀態(tài)，水溫，藻類（適應(yīng)低溫或者高溫藻種）相結(jié)合。
比如，如果投喂量不足，會(huì)導(dǎo)致幼體發(fā)育參差不齊，成活率降低；投喂多，后期倒藻的影響就比較大，也浪費(fèi)資源 ，這需要用其它藥品改良劑或者菌類來(lái)再平衡。
減小不良的影響，找到育苗期投喂合適的點(diǎn)，主要是觀察幼體發(fā)育同步性（各個(gè)期在設(shè)定的時(shí)間范圍類的變異系數(shù)），另外育苗期水色所受其它物質(zhì)影響較大，可作為輔助參考
作者: 牧陽(yáng)長(zhǎng)青    時(shí)間: 2016-9-14 22:52
本帖最后由 牧陽(yáng)長(zhǎng)青 于 2016-9-14 22:55 編輯
pl35 發(fā)表于 2016-9-4 15:18
需要把藻類濃度（藻細(xì)胞密度）和幼體密度，狀態(tài)，水溫，藻類（適應(yīng)低溫或者高溫藻種）相結(jié)合。
比如，如 ...

樓主方便推送一些苗的視頻不？蚤狀期糠蝦仔蝦都可以，看看平時(shí)購(gòu)買的苗與貴公司苗差別，這里不方便的話，郵箱：15057625004@163.com
作者: RRfeng    時(shí)間: 2016-12-11 15:13
占個(gè)位子，坐等分享。
作者: 陳仕玥    時(shí)間: 2017-1-3 18:14
樓主我想知道哪里有角毛藻藻種購(gòu)買？或者換，好點(diǎn)的
作者: fyjo    時(shí)間: 2017-1-12 10:53
育苗屆的明燈
作者: 一片云    時(shí)間: 2017-1-12 11:35
陳仕玥 發(fā)表于 2017-1-3 18:14
樓主我想知道哪里有角毛藻藻種購(gòu)買？或者換，好點(diǎn)的

你明天晚上就可以問(wèn)樓主了，明天晚上有樓主的微課，課堂網(wǎng)址是：

http://m.qlchat.com/topic/230000327097047.htm?preview=Y&intoPreview=Y
作者: Lois何    時(shí)間: 2017-2-12 23:16
好帖，留個(gè)記號(hào)！


方便以后回來(lái)看




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